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      myTXTL體外蛋白表達系統的特點都有什么呢

      發布時間:2021-10-14      點擊次數:298
         myTXTL是一種簡單快速的蛋白質體外表達系統?;虻霓D錄和翻譯基于大腸桿菌的內源TXTL機制,在體外建立高效的無細胞反應體系。同時,又保證表達系統的兼容性。myTXTL無細胞蛋白表達技術,這個技術可以替代原核細胞大腸桿菌表達系統,可以解決蛋白表達不出來、表達的蛋白沒有活性、原核蛋白表達產物有包涵體的問題。除此之外,這個技術能夠應用于可溶蛋白和膜蛋白表達、蛋白質功能鑒定、高通量篩選、分子間互作分析。
        myTXTL體外蛋白表達系統的特點:
        操作簡單,僅需將線性模板或質粒與myTXTL? Master Mix混勻,目標蛋白在數小時內即可表達出來。不需要轉化、克隆篩選和細胞裂解,避免了包涵體的形成。同時,避免了產物純化過程中目標蛋白的損失。
        一次實驗可對多個樣品進行操作,最小的反應體系是12μl,表達出來的蛋白濃度能達到1μg/μL,反應體系可等比例擴大。反應系統里添加了7種大腸桿菌稀有密碼子,去除了密碼子偏好的問題,并且表達的蛋白可正常折疊。
        myTXTL蛋白表達不出來、表達出的蛋白沒有活性、蛋白表達過程中容易形成包涵體等情況,出現這些情況的原因:
        1、表達條件需要進一步優化。比如溫度、分子伴侶、適合的表達宿主等;
        2、目的蛋白不適合在大腸桿菌中表達。包括稀有密碼子、mRNA結構、跨膜區等;
        3、采用哪種溫和復性條件可以提高蛋白活性,減少包涵體的形成等等。
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